生物安全實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)規(guī)范

單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級(jí),第三級(jí),第四級(jí),第五級(jí),2017/1/12,#,生物安全實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范,2009,年，北京理工大學(xué)爆炸事故,原因：厭氧培養(yǎng)箱壓力不穩(wěn)定,2015,年，清華大學(xué)實(shí)驗(yàn)室爆炸事故,原因：氫氣瓶爆炸起火,2008,年，云南大學(xué)實(shí)驗(yàn)室發(fā)生化學(xué)爆炸，導(dǎo)致一名男博士毀容斷掌,2010,年，東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室因未按規(guī)定對(duì)山羊標(biāo)本進(jìn)行檢疫，導(dǎo)致,28,人感染嚴(yán)重布魯氏桿菌傳染生物危險(xiǎn),輻射危險(xiǎn),個(gè)體防護(hù),危險(xiǎn)廢物的處理,常用儀器使用的注意事項(xiàng),化學(xué)危險(xiǎn),主要是由標(biāo)本攜帶的可傳染病毒等,生物危險(xiǎn),生物安全實(shí)驗(yàn)室（,Biosafety laboratory,）是通過(guò)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造、實(shí)驗(yàn)設(shè)備的配置、個(gè)人防護(hù)裝備的使用，通過(guò)嚴(yán)格遵守預(yù)先制定的標(biāo)準(zhǔn)操作程序和管理規(guī)范等綜合措施，確保操作生物危險(xiǎn)因子的工作人員不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象的傷害，確保周?chē)h(huán)境不受其污染的實(shí)驗(yàn)室根據(jù)實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)等級(jí)分為：,BSL-1,（最低）：適用于通常情況下不會(huì)引起人畜疾病的微生物,BSL-2,：適合與從事對(duì)人和環(huán)境有中度危害的生物因子的工作BSL-3,：適用于主要通過(guò)呼吸途徑吸入使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的微生物及其毒素。

BSL-4,（最高）：適用于對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度的危險(xiǎn)性，通過(guò)氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無(wú)有效疫苗或治療方法的致病性微生物或未知傳播風(fēng)險(xiǎn)的有關(guān)病原體及其毒素,臨床樣本均具有不同程度的潛在傳染性,血液傳播性病原體（如,HBV,和,HIV,）的操作應(yīng)在,BSL-2,下進(jìn)行,應(yīng)由受過(guò)培訓(xùn)的人員采集患者的血樣,操作時(shí)應(yīng)戴手套及眼睛和粘膜的保護(hù)裝置,血液和血清應(yīng)當(dāng)小心吸取，不能傾倒,適當(dāng)?shù)南緞﹣?lái)清洗噴濺和溢出的標(biāo)本,感染性廢物應(yīng)經(jīng)過(guò)滅菌和焚燒處理,實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)化學(xué)危險(xiǎn)品及標(biāo)識(shí),化學(xué)危險(xiǎn),乙醚、乙醇、乙醛、苯、甲醇,強(qiáng)酸（濃鹽酸、濃硫酸）、強(qiáng)堿（氫氧化鈉）或其他腐蝕品（氯化銅、甲醛溶液）,受熱、受壓或撞擊時(shí)產(chǎn)生爆炸或燃燒，如疊氮鈉、,TNT,高溫、摩擦、撞擊等易燃燒，甚至爆炸，如硝酸鹽等,釙、鐳、鈷等，高毒甚至劇毒,揮發(fā)性強(qiáng)，可以通過(guò)口鼻等進(jìn)入身體危害健康,Trizol,含有苯酚，有毒性和刺激性，應(yīng)避免皮膚接觸眼睛接觸可能導(dǎo)致失明，皮膚大量接觸可能致死如不慎接觸皮膚，應(yīng)立即用大量去垢劑和水沖洗溴化乙錠,(EB,),強(qiáng)誘變劑，嵌入堿基分子中導(dǎo)致錯(cuò)配，高致癌性應(yīng)避免皮膚接觸或者吸入，操作時(shí)穿戴合適的防護(hù)服、手套和護(hù)目鏡。

焦磷酸二乙酯（,DEPC,）,是一種潛在的蛋白質(zhì)變質(zhì)劑，且為可疑的致癌劑開(kāi)啟時(shí)瓶口不要指向操作者或其他人瓶?jī)?nèi)壓可導(dǎo)致噴濺戴好手套并穿實(shí)驗(yàn)室工作服，在通風(fēng)櫥內(nèi)操作三羥甲基氨基甲烷,(,Tris,),吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害戴好手套、口罩和護(hù)目鏡,氯仿（三氯甲烷）,刺激眼睛、呼吸道、皮膚和黏膜，為一種致癌劑有肝、腎毒性有揮發(fā)性避免吸入蒸汽戴好手套和護(hù)目鏡在通風(fēng)櫥內(nèi)操作生物實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)危險(xiǎn)品,-,巰基乙醇,吸入或皮膚吸收可致命，攝入有害高濃度溶液對(duì)黏膜、上呼吸道、皮膚和眼睛有極大損害巰基乙醇有難聞氣味,，,應(yīng)戴好手套和護(hù)目鏡,，,在通風(fēng)櫥內(nèi)操作丙烯酰胺,為一種潛在的神經(jīng)毒素，可通過(guò)皮膚吸收（有累積效應(yīng)）應(yīng),戴好手套和面罩，在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)操作蛋白酶,K,有刺激性吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害戴好手套口罩和護(hù)目鏡四甲基乙烯二胺（,TEMED,）,易燃易揮發(fā)，具有腐蝕性和強(qiáng)神經(jīng)毒性避免皮膚接觸和吸入過(guò)硫酸銨,對(duì)黏膜組織、上呼吸道、眼睛和皮膚有極大的破壞性吸入可致命戴好手套和護(hù)目鏡，穿好防護(hù)服必須在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)操作操作后要徹底清洗十二烷基硫酸鈉（,SDS,）,有毒性和刺激性，有嚴(yán)重?fù)p傷眼睛的危險(xiǎn)。

吸入，攝入，皮膚吸收可造成損傷戴好手套和護(hù)目鏡，不要吸入粉塵甲醇,有毒，可致失明吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害要有足夠的通風(fēng)以減少揮發(fā)氣不要吸入這些氣體戴好手套和護(hù)目鏡，在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)操作丙酮,易燃易揮發(fā)，對(duì)眼鼻喉有刺激性，對(duì)中樞神經(jīng)有一定的麻醉作用，避免皮膚接觸或吸入甲醛,有劇毒性和揮發(fā)性也是一種致癌劑可通過(guò)皮膚吸收，對(duì)皮膚、眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激或損傷避免吸入氣體戴好手套和護(hù)目鏡始終在通風(fēng)櫥內(nèi)操作遠(yuǎn)離熱源、火花和明火過(guò)氧化氫,有腐蝕性、毒性，對(duì)皮膚有強(qiáng)損害性吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害戴好手套和護(hù)目鏡，只在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)操作苯酚,有劇毒性和高度腐蝕性，可致嚴(yán)重?zé)齻?，攝入，皮膚吸收可造成傷害戴好合適的手套和護(hù)目鏡，穿好防護(hù)服，在通風(fēng)櫥內(nèi)操作若有皮膚接觸藥物，可用大量清水沖洗，并用肥皂和水清洗，不要用乙醇洗化學(xué)品的存儲(chǔ),在適宜的溫度和濕度下儲(chǔ)存化學(xué)品，須,遠(yuǎn)離高熱源,，,如烤箱,；避免陽(yáng)光直射，如靠近窗臺(tái),定期目測(cè)原料和包裝容器：顏色、是否溢出、腐蝕等,不得將化學(xué)品存放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，防止被碰倒,不得將化學(xué)品存放在地面上，即使是臨時(shí)放置也不允許,不能將通風(fēng)櫥用作化學(xué)品的存放地，以免破壞通風(fēng)櫥的通風(fēng)效果,不得將易漏有害性或腐蝕性化學(xué)品存放在視力水平以上的藥品架上,主要是,紫外線,（,UV,）,超凈工作臺(tái),瓊脂糖凝膠電泳成像系統(tǒng),紫外滅菌后一定要關(guān)閉紫外燈，并且打開(kāi)鼓風(fēng),瓊脂糖凝膠回收時(shí)一定要加放紫外擋板或者佩戴防護(hù)鏡。

輻射危險(xiǎn),個(gè)體防護(hù),實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)出,進(jìn)入,退出,公共,清潔區(qū),更衣室,緩沖間,污染區(qū),污染區(qū),緩沖間,更衣室,公共,清潔區(qū),淋浴間,在進(jìn)行可能接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動(dòng)物的操作時(shí)，應(yīng)戴上合適的手套手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨后必,須,認(rèn)真,洗,手,在,處理完感染性實(shí)驗(yàn)材料和動(dòng)物后，以及在離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前，都必須洗手,禁止非工作人員人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，或必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意后方可進(jìn)入在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū),禁止吸煙,禁止在實(shí)驗(yàn)室放置食物、飲料及類(lèi)似的存在有潛在的從手到口的接觸途徑的其他物質(zhì)禁止用實(shí)驗(yàn)室的冰箱（柜）等儲(chǔ)存?zhèn)€人物品在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)應(yīng),穿實(shí)驗(yàn)服或防護(hù)服,，服裝應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的要求,鞋子應(yīng)具有一定的防滑功能處理腐蝕性或毒性物質(zhì)時(shí)必須做好防護(hù)工作,應(yīng)使用安全鏡、面罩或其他的眼睛和面部防護(hù)用品嚴(yán)禁穿著實(shí)驗(yàn)室服離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域,在實(shí)驗(yàn)工作區(qū)頭發(fā)不可下垂，避免與污染物質(zhì)接觸或影響實(shí)驗(yàn)操作，有此類(lèi)危險(xiǎn)的飾物應(yīng)避免帶入工作區(qū)不可留長(zhǎng)胡須常用儀器使用的注意事項(xiàng),離心機(jī),在裝載離心管后應(yīng),正確平衡,離心管應(yīng)始終牢固蓋緊,放置好離心管后蓋上蓋子才可開(kāi)始離心,離心機(jī)放置高度應(yīng)使實(shí)驗(yàn)人員能看到離心機(jī)內(nèi)部,有危險(xiǎn)性的微生物，必須使用可封口的離心桶,高壓滅菌鍋,滅菌條件組合,134,o,C 3min,，,126,o,C 10min,，,121,o,C 15min,，,115,o,C 25min,注意事項(xiàng),物品應(yīng)放在空氣能排出并具有良好滲透性的容器中，,包裝稍松散，,待滅菌的物品放置不宜過(guò)緊。

滅菌完畢后，不可放氣減壓，否則瓶?jī)?nèi)液體會(huì)劇烈沸騰，沖掉瓶塞而外溢甚至導(dǎo)致容器爆裂待溫度下降到,80,以下后才可打開(kāi)門(mén)取出物品烘箱,烘箱嚴(yán)禁烘焙易燃、易爆物品使用烘箱時(shí)注意底層散熱板上不能放置物品烘箱內(nèi)物品不要塞得過(guò)滿(mǎn)，以免影響熱氣流流通當(dāng)烘箱進(jìn)行高溫烘焙時(shí)（如,200,以上），嚴(yán)禁直接打開(kāi)箱門(mén)冷空氣突然進(jìn)入可能使玻璃門(mén)及烘箱內(nèi)玻璃制品因驟冷而破裂烘箱周?chē)?2,米范圍內(nèi)不得放置或堆積任何易燃、易爆、易揮發(fā)性物品，如：汽油、紙類(lèi)、二甲苯、稀釋劑等烘箱溫度不能超過(guò)最高閾值當(dāng)利用烘箱滅菌需要較高溫度（,160,以上）時(shí)，不能放置紙、棉塞等低燃點(diǎn)易燃物嚴(yán)禁過(guò)夜使用烘箱，因?yàn)楫?dāng)烘箱溫控系統(tǒng)出現(xiàn)故障時(shí)會(huì)導(dǎo)致溫度不斷升高，容易引發(fā)安全事故應(yīng)在每個(gè)工作臺(tái)上放置盛放廢棄物的容器、盤(pán)子或廣口瓶，最好是不易破碎的容器,(,如塑料制品,),當(dāng)使用消毒劑時(shí)，應(yīng)使廢棄物充分接觸消毒劑,(,即不能有氣泡阻隔,),，并根據(jù)所使用消毒劑的不同保持適當(dāng)接觸時(shí)間盛放廢棄物的容器在重新使用前應(yīng)高壓滅菌并清洗廢棄物的處理,尿、胸水、腹水、腦脊液、涎液、胃液、腸液、關(guān)節(jié)腔液等在含有效氯消毒液中作用半小時(shí)以上，隨后交由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理機(jī)構(gòu)進(jìn)行處理。

痰、膿、血、糞,(,包括動(dòng)物糞便,),及其他液體標(biāo)本在含有效氯消毒液中作用,2,小時(shí)以上后交由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理機(jī)構(gòu)進(jìn)行處理對(duì)廢酸、廢堿等廢液采用中和法、稀釋法等稀釋至,pH,值為中性時(shí)方可排入下水道液體廢棄標(biāo)本,帶有血凝塊等的廢棄樣品管，在加蓋后應(yīng)當(dāng)放在適當(dāng)?shù)姆缆┤萜鲀?nèi)高壓滅菌和,(,或,),焚燒固體廢棄物標(biāo)本,剩余標(biāo)本，如組織器官、動(dòng)物尸體、檢驗(yàn)后的廢棄標(biāo)本及其容器，如塑料袋、紙袋,，應(yīng)及時(shí)交由醫(yī)療廢棄物處理機(jī)構(gòu)處理檢驗(yàn)剩余的標(biāo)本及使用過(guò)的帶菌平板、試管均須集中地點(diǎn)安全放置，經(jīng)消,毒后交由醫(yī)療廢棄物處理機(jī)構(gòu)處理操,作區(qū)須備有消毒缸，以處理沾有活菌的玻片等污染物品皮下注射針頭用過(guò)后不應(yīng)再重復(fù)使用，包括不能從注射器上取下、回套針頭護(hù)套、截?cái)嗟?，?yīng)將其完整地置于盛放銳器的一次性容器,中，交由醫(yī)療廢棄物處理機(jī)構(gòu)處理。